2022/04/05
多血小板血漿（Platelet Rich Plasma；PRP）
不妊症、不育症、卵巣機能不全での応用
血小板に含まれる成長因子
血小板にはさまざまな機能を持つ顆粒が貯蔵されていて、ここから放出される成長因子によりその作用を発揮します。
例えば血小板のα顆粒には、血小板由来増殖因子（platelet derived growth factor；PDGF）、形質転換増殖因子（transforming growth factor；TGF-β）、血管内皮細胞増殖因子（vascular endothelial growth factor；VEGF）、血小板由来内皮細胞増殖因子（platelet-derived endothelial cell growth factor；PD-ECGF）などの液性の増殖因子が含まれ、血小板の粘着、凝集の際に活性化するとこれらの増殖因子が細胞外に放出され、組織の損傷の修復を行うなどの効果を発揮すると考えられています。
PDGFは主として線維芽細胞や平滑筋細胞、PD-ECGFは血管内皮細胞の増殖を促進し、TGF-βは血球細胞やリンパ球などに対して増殖抑制因子として働くとされています。
また、これらの増殖因子は肝硬変などの線維化を伴う疾患の進展に重要な役割を果たす他、動脈硬化やがんの病因、炎症、創傷治癒、胎児の筋肉や骨格の成長・血管新生等に関与していると考えられています。
PRP治療は、患者さんの血小板に含まれているこれらの成長因子を高濃度で子宮または卵巣内に注入する方法です。
胚移植を予定している月経周期の１０～１２日目の子宮内注入により子宮内膜の機能が改善して、子宮内膜が厚くなったり、着床しやすくなるとされています。
また、採卵日の卵巣内注入により卵巣機能が改善し、２～３か月後以降の卵胞数や採卵数が増加したり、卵子の質が改善するとされています。
論文紹介１（子宮内注入）
生殖補助医療を受ける着床不全を繰り返す女性における自己多血小板血漿の効果について
Effects of Autologous Platelet-Rich Plasma in women with repeated implantation failure undergoing assisted reproduction 15-1757-Effects.pdf
目的：反復着床不全（RIF）は生殖医療における大きな課題です。
一方、卵細胞質内注入法（ICSI）または体外受精（IVF）を受けている女性における多血小板血漿（PRP）の使用については、まだ確認された結果がありません。したがって、本研究の目的は、ICSIを受けている女性の妊娠成績に対するPRPの子宮内注入の効果を評価することです。
方法：この前向き二重盲検臨床試験では、凍結融解胚移植の候補である、過去に少なくとも2回の原因不明のRIFを行った女性100人を2群に割り付けました。
一方はPRP（0.5CC、末梢血サンプルの4～5倍の血小板を含有、胚盤胞移植の48時間前に実施）の子宮内注入による治療、他方は子宮内カテーテルのみによる治療でした。
両群の着床率を比較しました。
結果：介入サブグループの妊娠率は２０％であったのに対し、対照サブグループでは１３．３３％であり、両群間に有意な統計的差異がありました。
結論：本論文によると、PRP はRIF患者の妊娠転帰の改善に成功する可能性があり、RIF患者におけるPRP 治療の有効性を確認するために、より大きなサンプルによる他の研究を強く推奨します。
論文紹介２（子宮内注入）
自己多血小板血漿は、新鮮および凍結融解胚移植周期において、様々な病因による難治性の薄い子宮内膜を持つ女性において、子宮内膜の厚さと妊娠転帰を最適化します。
Autologous platelet-rich plasma optimizes endometrial thickness and pregnancy outcomes in women with refractory thin endometrium of varied aetiology during fresh and frozen-thawed embryo transfer cycles 3-1735-Autologous.pdf
目的：新鮮体外受精（IVF）および凍結融解胚移植（FET）において、様々な病因により難治性の薄い子宮内膜を有する女性において、多血小板血漿（PRP）が子宮内膜厚（EMT）を最適化し、生児出生率（LBR）を改善するかどうかを評価することです。
方法：三次救急病院のARTセンターで前向き介入研究を実施しました。
標準的なホルモン補充療法にもかかわらず難治性子宮内膜薄層（<7mm）と評価された不妊症女性 22 名を対象としました。
20名が新鮮IVF-ETおよびFET時に2018年12月～2020年6月に26回のPRPサイクルを実施しました。
主要評価項目はEMTの肥厚、副次的評価項目は新鮮およびFET周期と病因別における着床率（IR）、臨床妊娠率（CPR）、LBRでした。
結果：PRP投与後、新鮮IVFおよびFETにおいてそれぞれ平均EMTが有意に増加しました（P<0.0001）。
CPR、IR、LBRは新鮮とFETで有意差を認めませんでした（p>0.05）。
PRPは、結核、卵巣予備能の低下、多嚢胞性卵巣症候群でEMTを有意に増加させました（p<0.001）。
CPR、IR、LBRには3つの病因間で有意な差はありませんでした（p>0.05）。
臨床的妊娠率およびLBRはそれぞれ20％および25％に達しました。また，副作用は報告されませんでした。
結論：PRPは、結核、PCOS、DORに伴う薄い子宮内膜の新鮮胚移植周期およびFET周期においてEMTを著しく促進し、これらの予後不良患者におけるCPRおよびLBRを改善します。
論文紹介３（子宮内注入）
反復着床不全における自己多血小板血漿の効果：無作為化比較試験
The effects of autologous platelet-rich plasma in repeated implantation failure: a randomized controlled trial: Human Fertility: Vol 23, No 3 (tandfonline.com)
反復着床不全は生殖医療における大きな課題であり、その管理方法についてはいくつか記載されているものの、どれが最も効果的であるかについてはほとんどコンセンサスが得られていないのが現状です。
本研究は、自己多血小板血漿の反復着床不全における妊娠率改善効果を評価するために実施されました。
2016年から2017年にかけて、良好胚を用いた3回以上の胚移植後に妊娠しなかった患者さんで、凍結融解胚移植の候補者である計138名を対象に、本研究への参加資格の評価を行いました。
胚盤胞移植の48時間前に、末梢血の4～5倍の濃度の血小板を含む自己多血小板血漿（PRP）0.5mlの子宮内注入を実施しました。
対照群には標準治療を行いました。
97名の患者が試験手順を完了しました。
年齢、体格指数、過去の胚移植の回数において、両群間に有意差はありませんでした。
化学的妊娠率はPRP群がコントロール群より高値でした（それぞれ53.06％対27.08％、p値：0.009）。
臨床妊娠率は、PRP群がコントロール群より高値でした（それぞれ44.89%対16.66%、p値：0.003）。
以上より、子宮内自己多血小板血漿は、反復着床不全の妊娠予後の改善に有効であると考えられます。
論文紹介４（子宮内注入）
子宮内への多血小板血漿の投与は、反復着床不全女性において、子宮内膜の厚みを増すことにより胚の着床を改善する：単群自己対照試験
Intrauterine administration of platelet‐rich plasma improves embryo implantation by increasing the endometrial thickness in women with repeated implantation failure: A single‐arm self‐controlled trial (wiley.com)
目的：本研究の目的は、子宮内膜が薄い日本人患者における凍結胚移植（FET）周期での多血小板血漿（PRP）の子宮内投与の有効性を検討することです。
方法：日本国内で前向き単群自己対照試験を実施しました。
子宮内膜が薄い（7mm以下）対象者39名中36名にPRP投与を行いました。
エストロゲンによるホルモン補充療法（HRT）を2月経周期行い、HRT2周期目の10日目と12日目にPRPを投与しました。
子宮内膜の厚さは、毎回、主治医と専門医の2名の医師が超音波検査の日時を盲検化して経腟超音波検査で評価しました。
FETはPRP投与後のHRT2周期目に実施しました。
結果：PRP投与後、14日目の平均（SD）子宮内膜厚は、非盲検測定で1.27mm（P < .001）、盲検測定で0.72mm（P = .001）、それぞれ有意に増加しました。
36名の患者のうち、32名（88.9％）がFETを実施しました。
臨床妊娠率は15.6％でした。
有害事象は発生しませんでした。
結論：PRP療法は、安全かつ効果的に子宮内膜の厚みを増加させ、妊娠率を向上させる可能性があることがわかりました。
論文紹介５（子宮内注入）
ヒト血小板溶解液は反復着床不全患者のヒト子宮内膜細胞を試験管内で増殖を刺激します
Human platelet lysates stimulate in vitro proliferation of human endometrial cells from patients with a history of recurrent implantation failure – F&S Science (fertstertscience.org)
目的：自己多血小板血漿（PRP）およびその凍結保存液である血小板溶解液（PLP）の分離を最適化し、市販のヒト血小板溶解液（PLUS）と比較検討し、試験管内でのヒト初代子宮内膜細胞への増殖刺激性を検討します。
患者：健康な献血者3名と反復着床不全の患者8名。
介入方法：自己および非自己のHPL（PLUS; Compass Biomedical）を用いて、試験管内で分離した初代子宮内膜上皮細胞および子宮内膜間質細胞を刺激して増殖させました。
主な評価項目:単離PRP/PLおよび市販HPL中の血小板由来成長因子BBホモダイマー蛋白量、PLで24時間または48時間刺激後の子宮内膜上皮細胞および子宮内膜間質細胞の増殖（代謝活性およびKi67発現で測定）です。
結果：自己PRP/PLの分離を最適化し比較するために、3つの二重遠心分離プロトコルを用いて、フローサイトメトリーによる血小板収量（CD45-CD41+CD61+）と酵素結合免疫吸着法による血小板由来成長因子BBホモダイマー蛋白質含有量を評価しました。
特に我々の最速プロトコルで分離された凍結保存PLは、新鮮なPRPと比較して、より高いタンパク質濃度を含んでおり、したがって実験の柔軟性にとって最適でした。
自家PRPと市販のPRPは、試験管内で同等の免疫・成長因子含有量と細胞増殖刺激性を示しました。
結論：この結果は、子宮内膜の成長を刺激するためにHPLを分離して使用するための基礎となるものです。
さらに、市販のPLは一貫して細胞増殖を刺激し、反復着床不全に対する臨床治療の標準化を可能にすると思われます。
多血小板血漿（PRP） 不妊症、不育症、卵巣機能不全での応用 （2）子宮内注入 | tsudanuma-ivf-clinicのブログ (ameblo.jp)